بررسی انتقال ژن vp28 به میکروجلبک
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری - دانشکده علوم کشاورزی
- نویسنده سیدمهدی رضایی
- استاد راهنما سید داود حسینی حمید نجفی علی پاکدین
- سال انتشار 1392
چکیده
چکیده یکی از مهمترین مشکلات صنعت آبزی پروری به ویژه تولید میگو، خسارت بالای ناشی از بیماری های ویروسی است. بیماری لکه سفید میگو یکی از شایع ترین بیماری های ویروسی می باشد. ژن vp28 مهمترین ژن عامل بیماری در پوشش سلولی ویروس است که خاصیت ایمینولوژی آن در تولید واکسن به اثبات رسیده است. در این تحقیق امکان تولید واکسن خوراکی برای میگو با انتقال ژن vp28 به میکروجلبک مورد بررسی قرار گرفته است. ژن vp28 از موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی شعبه منطقه مرکزی کشور(اراک) هدیه داده شد. پس از بررسیهای بیوانفورماتیکی روی توالیهای ژنی مشابه موجود در بانک ژن، پرایمرهای اختصاصی برای تکثیر ژن vp28 طراحی گردید. محصولات بدست آمده از pcr نمونه های نمونه های میگوی آلوده به ویروس در وکتور ptz57r/t و سپس در وکتور pet28a همسانه‌سازی و توالییابی گردید. ژن vp28 ابتدا به پلاسمید pbi121 انتقال داده شد و سپس ژن مورد نظر به همراه پروموتور و ترمیناتور موجود در پلاسمید pbi121 به جایگاه کلونینگ پلاسمید pcambia1304 منتقل گردید. میکروجلبک های کلرلا ولگاریس( chlorella vulgaris ) و اسپیرولینا پلتنسیس( spirulina platensis ) در محیط زاروک کشت شده و مقاومت هر کدام از آنها به آنتی بیوتیک هاگرومایسین مورد سنجش قرار گرفت. تراریخته کردن اسپیرولینا و کلرلا از الکتروپوریشن استفاده شد. علاوه بر این از سویه های مختلف آگروباکتریوم تومفاشین (gv3101 , eha101 , gv3850 lba4404 ) برای تولید کلرلای تراریخت استفاده شد. ادغام ژن vp28 در سلولهای کلرلا توسط الکتروپوریشن و همچنین با واسطه سویه های eha101 , gv3850 موفقیت آمیز بود. در حالیکه انتقال ژن vp28 به اسپیرولینا پلتنسیس در این تحقیق حاصل نشد. بر اساس نتایج بدست آمده تولید سلول های کلرلای تراریخته حاوی ژن پوششی vp28 امکان پذیر بوده و پتانسیل استفاده از این سلول های تراریخته به عنوان واکسن برای مقابله با بیماری ویروسی لکه سفید میگو وجود دارد. بیان ژن vp28 در سلولهای کلرلای تراریخته با استفاده از rt-pcr مورد بررسی قرار گرفت و حضور رونوشت های ژن مذکور در این سلول ها تأیید گردید. کلمات کلیدی: لکه سفید میگو، vp28، میکروجلبک تراریخت، کلرلا ولگاریس، اسپیرولینا پلتنسیس
منابع مشابه
روش انتقال ژن به گیاه ترشک(Rumex acetosa L.)
در این مطالعه عوامل موثر بر انتقال ژن به گیاه ترشک مورد بررسی قرار گرفت. از اگرو باکتریوم، سویه LBA4404 حاوی پلاسمید pBI121، وغلظتهای مختلف کانامایسین و زمان‌های مختلف تلقیح با استفاده از ریز نمونه برگ برای ارزیابی انتقال ژن گزارشگر gus استفاده گردید. کشت قطعات برگ روی محیط کشت MS دارای 5/1 میلی‌گرم در لیترBAP و 75/0 میلی‌گرم در لیترIAA و غلظت‌های کانامایسین صفر، 10، 25، 50، 75 و 100 میلی گرم...
متن کاملبررسی امکان تولید سوخت بیودیزل از میکروجلبک
پایان پذیری سوخت های فسیلی و بحران های زیست محیطی محققان را بر آن داشته تا به دنبال سوخت های جایگزینی باشندکه هم تجدیدپذیر بوده و هم آلودگی کمتری ایجاد کنند. سوخت های بیولوژیک و مخصوصا بیودیزل به عنوان یک سوخت جایگزین در موتورهای دیزل فعلی می باشد. بیودیزل استرهای اسید چرب است که از روغن های گیاهی یا چربی های حیوانی تولید بیودیزل می شود، اما این روغن ها به عنوان غذا مطرح بوده و نمی توانند منا...
متن کاملبهینه کردن انتقال ژن به واسطه اگروباکتریوم در گیاه دارویی زنیان با استفاده از ژن fld
به منظور بهینه کردن شرایط انتقال ژن به گیاه دارویی زنیان عوامل مختلف شامل رقت آگروباکتریوم، سویه آگروباکتریوم، نوع آنتی بیوتیک کشنده آگروباکتریوم، غلظت استوسرینگون و مدت زمان تلقیح بر روی تعداد گیاهان باززا شده با استفاده ازسازه ژنی p6U-Ubi-FVT دارای ژن انتخابیHPT و ژن fld بررسی شد. غلظت 20 میلی گرم در لیتر هیگرومایسین برای غربالگری سلول های تراریخت و جلوگیری از تولید کالوس در سلول های غیر ترار...
متن کاملبهینهسازی انتقال ژن به ارقام گلابی (Pyrus communis L.) با استفاده از ژن گزارشگر gus
Nowadays, genetic engineering methods are able to reduce the time of breeding programs for improvement of fruit trees, as well as offering a focused breeding system. The purpose of the present investigation was to study the factors that affect Agrobacterium tumefacience mediated transformation of two pear cultivars: Bartlett and Harrow Delight. Two explants (leaves and axillary shoot meristems)...
متن کاملهمسانهسازی ژن زیرواحد بتا هورمون گونادوتروپین جفت انسانی در پی انتقال ژن به اسپرم خروس
هدف از این مطالعه، همسانه‌سازی‌زیرواحد بتای هورمون گونادوتروپین جفت انسانی در ناقل مناسب بود که بتواند از طریق اسپرم در تولید طیور تراریخت به کار گرفته شود. به این منظور زیرواحد بتای این هورمون به کمک یک جفت آغازگر اختصاصی تکثیر و درناقل T همسانه‌سازی شد. فرآیند ترانسفورماسیون پلاسمید نوترکیب در سلولهای مستعد اشریشیاکلی انجام گرفت و کلونی‌های دارای پلاسمید نوترکیب به‌وسیله PCR انتخاب شدند. صح...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری - دانشکده علوم کشاورزی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023